Introducción
La concepción moderna en la etiología de la periodontitis establece un modelo multifactorial.
Desde el punto de vista del tratamiento de esta afección, y especialmente en las modalidades terapéuticas con quimioterápicos, la investigación en animales de experimentación permite estudiar histológica e histomorfométricamente el comportamiento de los tejidos periodontales luego del control de la infección.
El Metronidazol es una droga perteneciente al grupo de los Nitroimidazoles que ejerce su efecto sobre Trichomonas vaginalis, espiroquetas y además una acción bactericida sobre microorganismos anaeróbicos (1).
A menudo la enfermedad periodontal esta asociada a bacterias anaerobias y en consecuencia, el metronidazol fue usado para evaluar su eficacia en el tratamiento de ésta afección en estudios clínicos y experimentales (2, 3, 4, 5, 6 y 7 ). Los resultados obtenidos fueron variables y dependieron del régimen de tratamiento y de la eficacia de la instrumentación mecánica cuando fueron usadas en forma conjunta.
En nuestro conocimiento no se han reportado estudios hitomorfométricos dirigidos a evaluar el efecto de esta droga en el tratamiento de periodontitis experimentales.
El objetivo del presente trabajo fue evaluar distintos parámetros morfométricos del hueso alveolar luego de la administración local de metronidazol en ratas con periodontitis experimentales.
Materiales y Métodos
Se utilizaron para este estudio 20 ratas Sprague Dawley de 250gr de peso mantenidas en condiciones normales de laboratorio y distribuidas en grupos de cinco, denominados grupos 1, 2, 3 y 4.
Los animales del grupo 1 fueron utilizados como controles absolutos. A los de los grupos 2, 3 y 4 se les colocaron bajo anestesia general (inyección intraperitoneal de etil uretano, en una dosis de 1gr/Kg de peso) una ligadura cervical de alambre de acero coaxial de diámetro 5-0 en el primer molar inferior derecho, el día 21 de la experiencia se retiraron las ligaduras. Los animales del grupo 2 fueron sacrificados inmediatamente después del retiro de la ligadura. Los de los grupos 3 y 4 fueron sacrificados el día 36 de la experiencia. Entre los días 21 y 36 se realizaron irrigaciones en la bolsa periodontal cada 48 horas con 0,5ml de agua destilada en el grupo 3 y 0,5ml de Metronidazol al 5% en el grupo 4.
Luego del sacrificio por inhalación de cloroformo, los maxilares inferiores fueron disecados, fijados en formol al 10%, descalcificados en EDTA al 10% (pH 7.2) e incluidos en parafina. Se realizaron cortes mesiodistales de los primeros molares y se colorearon con H-E.
Se obtuvieron esquemas a partir de las proyecciones de los cortes histológicos y el estudio histomorfométrico fue realizado en el espacio interradicular (Fig 1). Las zonas de reabsorción y formación ósea observadas al microscopio, fueron luego transferidas a las zonas correspondientes en los esquemas. Los siguientes parámetros morfométricos fueron analizados según los principios de la estereología (8):
- Porcentajes de superficies de reabsorción y formación ósea en la superficie periodontal del hueso interradicular.
- Perdida ósea, considerada como el porcentaje que ocupa el espacio periodontal comprendido entre la furcación de las raíces y la cresta del hueso interradicular, en la altura total del espacio interradicular (Fig 1).
- Volumen óseo, considerado como la razón entre el volumen trabecular y el volumen óseo total, en el tercio cervical. (Fig. 1)
Para el análisis estadístico de los datos obtenidos en este estudio se utilizó el test de Kruscall-Wallis.
Figura 1. Para la definición del área de estudio, sobre la proyección de los cortes histológicos se trazó el segmento AB tangente a los ápices de las raíces mesial y distal. Desde el punto medio de AB, se trazó hacia el punto medio de la furcación el segmento CD. Este a su vez se dividió en tres segmentos iguales por los puntos E y F por los que se trazaron dos líneas paralelas a AB, las que dividieron al espacio interradicular en los tercios cervical, medio y apical. El segmento CD, determinó el punto G en su intersección con la cresta del hueso interradicular. La pérdida ósea se determinó sobre el segmento CD según la siguiente relación: PO = CG/CD x100
Para el análisis estadístico de los datos obtenidos en este estudio se utilizó el test de Kruscall-Wallis.
Figura 2. Media y desviación estándar de los valores de pérdida ósea en los diferentes grupos.*p< 0.05 con respecto al grupo 2. Test de Kruscall-Wallis.
Resultados
Análisis Histológico
En condiciones normales el ligamento periodontal y el hueso alveolar de los molares de rata presentan características similares a las del humano (Fig. 3). Los animales del grupo 2 presentaron bolsas periodontales profundas sin inserción del epitelio de unión sobre la superficie dentaria, infiltrado inflamatorio subyacente a la acumulación de placa bacteriana entre las células epiteliales de la bolsa. El epitelio de la bolsa mostró acantosis, el infiltrado celular ocupó también el corion gingival y el ligamento periodontal. Se observaron zonas hemorrágicas, necróticas y de tejido de granulación en el ligamento periodontal y en los espacios medulares del hueso interradicular La superficie ósea periodontal presentó áreas erosivas e incrementos del número de osteoclastos (Fig. 4). Los grupos 3 y 4 presentaron bolsas periodontales poco profundas. Hubo una importante reducción del infiltrado inflamatorio en densidad y extensión en corion y ligamento periodontal en relación al grupo 2 (Figs 6 y 7). Se observó además una ancha zona de inserción del epitelio de unión a la superficie del cemento.
Figura 3. Caso perteneciente al grupo control. H&E 10x
Figura 4. Periodontitis de 21 días de evolución, nótese la reabsorción de la cresta ósea interradicular. H&E 10x
Figura 5. Caso perteneciente al grupo irrigado con agua destilada. Nótese la presencia de un infiltrado inflamatorio y congestión en la zona interradicular. H&E 10x
Figura 6. Caso perteneciente al grupo irrigado con 0,5 ml de metronidazol. Nótese la reducción del cuadro inflamatorio y de la pérdida ósea.
Análisis Morfométrico
Los resultados del análisis morfométrico se expresan en la tabla 1.
Tabla 1
Determinaciones Histométricas
±Desvío estándar RO%: Porcentajes de superficies de reabsorción ósea con respecto al total de la superficie periodontal en el hueso interradicular sobre el segmento A-B. (Fig 1).
FO%: Porcentajes de superficies de formación ósea respecto al total de la superficie periodontal en el hueso interradicular sobre el segmento A-B. (Fig 1).
PO%: Perdida ósea, porcentaje que ocupa el espacio periodontal comprendido entre la furcación de las raíces y la cresta del hueso interradicular, en el total de la altura del espacio interradicular.
VO: Volumen óseo, razón entre el volumen trabecular y el volumen óseo total, en el tercio cervical.
*p<0,05 con respecto al grupo 2. (Test de Kruscall-Wallis)
Discusión
El presente trabajo muestra en forma experimental, que en periodontitis tratadas por irrigación local con metronidazol fue posible observar aumentos en el volumen óseo y reducción de la pérdida ósea.
La enfermedad periodontal es producida por una variedad de microorganismos, siendo los anaerobios de fundamental importancia en el inicio y evolución de la periodontitis (9). En muchos casos, esta población microbiológica no puede ser eliminada por el raspaje y alisado radicular ya que se ubican en bolsas muy profundas, lesiones de furcación o han invadido los tejidos periodontales. Para subsanar esta dificultad es frecuente el uso de la combinación de terapias mecánicas y antibióticas. Los microorganismos que colonizan las bolsas periodontales sintetizan lipopolisacaridos y otros productos que inducen a las células inflamatorias a la liberación de diferentes citoquinas tales como la interleuquina 1 (IL1), IL3, IL6, factor de necrosis tumoral a y b y prostaglandina E2 (10, 11). Estos factores activan a los osteoclastos e inhiben a los osteoblastos, lo que da por resultado pérdida progresiva del hueso alveolar con reducción de su volumen.
Estudios clínicos y bacteriológicos en perros (5, 6) han demostrado que el metronidazol administrado en forma sistémica controla la formación de placa subgingival, el desarrollo de espiroquetas y formas móviles, como así también la inhibición de anaerobios, lo que reduce clínicamente la gingivitis y previene la periodontitis. En el presente trabajo, la aplicación local de metronidazol, ejercería un efecto similar sobre los citados microorganismos, con la consecuente reducción en la población de células inflamatorias y de la liberación de factores locales que promueven la reabsorción ósea.
Estos resultados indican que el control de los microorganismos de la placa en este modelo experimental reducen la inflamación gingival, se reestablece el equilibrio entre la formación y reabsorción ósea, y disminuye en consecuencia la pérdida ósea.
Referencias
- Litter M. Compendio de Farmacología. Cuarta Edición. Bs. As. Ed El Ateneo. 1992.
- Van Oosten M.A, Mikx F.H, Rengli H.H. : Microbial and clinical measurement of periodontal pocket during sequential periods of non treatment, mecanical debridementand metronidazol therapy. J Clinic Periodontol.(1987);14:197-204.
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- Loesche N.J, Giordano J.R, Hujopel P. Metronidazol in periodontitis: Reduced need of sugeri. J Clinic Periodontol. (1992); 19: 103-112
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