Trabajos Originales

Recibido para Arbitraje: 25/07/2014
Aceptado para Publicación:

Luciano-Muscio, Rosa. Profesor Asistente, Jefe de la Cátedra de Bioquímica de la Facultad de Odontología, Universidad Central de Venezuela.

INTRODUCCIÓN

La saliva es un fluido acuoso de la cavidad bucal que está constituido por una mezcla compleja de productos de secreción orgánica e inorgánica de las glándulas salivales y otras sustancias provenientes de las vías aéreas superiores, orofaringe, reflujo gastrointestinal, fluido crevicular y depósitos de alimentos, entre otros^1,2. Es el fluido del cuerpo más complejo y versátil, cumple una serie de funciones; en el tracto digestivo, en el esófago, en el proceso digestivo y en la protección de las células gástricas. Participa en la masticación, deglución, habla, lubricación, protección de la mucosa bucal; posee actividad antibacteriana, antifúngica y antiviral; interviene en el proceso de remineralización del diente, además se destaca, su función amortiguadora que regula el pH salival y el de la placa dental^3,4.

La saliva posee sistemas amortiguadores y reguladores del pH tales como las proteínas, sistema buffer fosfato, sistema buffer bicarbonato, siendo este último, el más importante de todos, la acción amortiguadora se realiza evitando cambios bruscos en el pH, y neutralizando la acción del ácido proveniente del metabolismo bacteriano por medio del sistema buffer bicarbonato / ácido carbónico5.

El flujo salival continuo, en ausencia de una estimulación externa, se denomina saliva en reposo o saliva no estimulada, mientras que la saliva estimulada se produce en presencia de estimulaciones externas como las comidas, los sabores, los olores, entre otros ⁵.

La cantidad de saliva total segregada diariamente se encuentra entre 500 y 700 mL; la saliva no estimulada está entre 0,25 y 0,35 mL/min y la saliva estimulada puede llegar a 1,5mL/min. En el flujo salival y cantidad de saliva, pueden influir otros factores como tamaño de las glándulas salivales, edad, estado emocional, posición del cuerpo, ritmo circadiano y estímulo gustativo. En el ciclo circadiano ocurre un aumento del flujo salival durante las 17 horas en la fase de vigilia y un mínimo durante el sueño, pudiendo llegar a cero. El estímulo gustativo, que es el más intenso de todos, induce a un incremento del flujo salival de hasta diez (10) veces, siendo el sabor ácido el más penetrante, seguido del dulce, salado y amargo^6,7.

El pH salival de la cavidad bucal oscila entre 6,7 y 7,56. Dependiendo de la dieta, si es rica en carbohidratos se produce un descenso del pH, si es rica en proteínas, se produce un aumento del pH. La saliva tiene la capacidad de neutralizar los ácidos, amortiguando las variaciones del pH, capacidad basada en los sistemas bicarbonato / ácido carbónico; fosfato / ácido fosfórico8.

El agua constituye el mayor componente salival, representa el 99% de su composición. Los componentes sólidos orgánicos e inorgánicos, son moléculas que se encuentran disueltas en el medio acuoso y pueden variar ampliamente de un individuo a otro e incluso, en el mismo individuo, varias veces en el día. Entre los componentes inorgánicos encontramos sodio (Na+), potasio (K+), cloro (Cl¯), calcio (Ca2+), bicarbonato (HCO3-), magnesio (Mg2+) y amoníaco (NH3). La parte orgánica contiene productos de secreción corporal como: urea, ácido úrico y creatinina; productos de putrefacción: putrescina, cadaverina; lípidos como colesterol y ácidos grasos, y más de 400 tipos de proteínas como: amilasa salival, mucinas, lisozimas, histatinas, cistatinas, lactoferrinas; proteínas ricas en prolina o derivadas del plasma como albúmina, inmunoglobulina A secretora, transferrina entre otras^9,10.

El uso de la saliva para el análisis de hormonas se ha hecho cada día más atractivo para clínicos e investigadores, debido a que su recolección, ofrece una muestra no invasiva, libre de estrés y constituye una alternativa en la recolección de sangre para la determinación de parámetros endocrinos tales como hormonas esteroideas, aminas, péptidos y otros¹¹.

La saliva ha sido objeto de estudio de numerosos endocrinólogos, durante 40 años han usado la saliva como muestra complementaria; revisiones de Riad-Fahmy y col. en 1982¹², Lewis en 2006¹³, se han enfocado en el análisis salival de muchos esteroides reportando numerosos estudios que demuestran que el monitoreo de la saliva es un método alternativo para analizar distintos tipos de hormonas.

La saliva es un portador de la señalización de moléculas las cuales son transportadas en las glándulas salivales desde los vasos sanguíneos o son producidas independientemente por las glándulas. Las hormonas esteroideas conjugadas, entran a las glándulas salivales por difusión pasiva; las hormonas no conjugadas, entran en las glándulas salivales por mecanismos de transporte activo; o son expresadas y secretadas por las glándulas salivales¹¹.

La velocidad con la cual las hormonas pueden ser transferidas desde la sangre a la saliva, es controlada por el paso a través de la capa lipofílica de los capilares y glándulas de las células epiteliales. Por consiguiente, las moléculas lipofílicas tales como hormonas esteroideas, son transferidas a través de estas barreras más rápidamente. La concentración de esteroides liposolubles no conjugados como el cortisol, refleja aproximadamente el 10% de la concentración del plasma15. Moléculas hidrofílicas tales como los péptidos, y las aminas^13,14, viajan por difusión pasiva, pasando a través de las paredes de los capilares, membrana basal y células acinares de las piezas secretorias terminales, a través de un gradiente de concentración y proteínas de transporte ancladas en la membrana celular. Algunos péptidos hormonales como la insulina16 son transportados activamente en saliva desde sus tejidos de origen, mientras que algunas citoquinas^17,18, son producidas en las mismas glándulas salivales. La selectividad de este transporte activo es demostrada por el hecho de que la insulina aparece en saliva a concentraciones similares que en el plasma después de la absorción de glucosa, pero el producto de su escisión, el péptido C, que es de un tamaño similar a la insulina, no entra en la saliva.

Los péptidos que se originan en las glándulas salivales se secretan por exocitosis directamente en el lumen acinar. El transporte activo dependiente de energía, provoca dificultades en la interpretación de las concentraciones salivales, porque las concentraciones de los péptidos salivales no siempre se correlacionan con las concentraciones del plasma, al igual que las concentraciones de esteroides que difunden pasivamente. Cabe destacar, que citoquinas como el factor de necrosis tumoral y moléculas como la leptina, aparecen en concentraciones más bajas en la saliva que en el plasma^19,20. Se ha observado que las concentraciones en saliva de otras citoquinas, como el factor de crecimiento epidermal²¹ y la grelina²², pueden ser iguales o superiores a las del plasma.

Debido a que los intervalos de referencia no están disponibles para las concentraciones salivales de hormonas peptídicas, los investigadores generalmente usan cualitativamente dichas hormonas, como sustancias marcadoras para determinadas enfermedades bucales más que como una alternativa no invasiva para mediciones cuantitativas.


OBJETIVO

Determinar la capacidad amortiguadora y el pH salival en mujeres en etapa reproductiva sin terapia hormonal, con terapia hormonal AC y en etapa menopáusica.

MÉTODO
Se recolectaron muestras de SE y SNE de 9 mujeres en edades comprendidas entre 33 y 56 años, las cuales se dividieron en tres grupos: el grupo 1 corresponde al control (mujeres en etapa reproductiva sin terapia hormonal), el grupo 2 (mujeres en etapa reproductiva con terapia hormonal [anticonceptivos] (AC) y el grupo 3 (mujeres en etapa menopáusica). A la saliva recolectada se le agregaron 3 gotas de aceite mineral para evitar la pérdida de CO2. Se tomaron 0,8 mL de cada muestra de saliva y se titularon siguiendo el método descrito por Singer y col. (1983), variando la concentración de HCl a 0,05 M (molar). El pH se midió en un potenciómetro marca Orion, modelo 710A y un electrodo para pH Accumet Fisher Scientific.


RESULTADOS

En las Tablas 1a.y 1b. se muestra el pH y la capacidad amortiguadora de la SE y SNE, dicha capacidad fue calculada como los microequivalentes de ácido clorhídrico ( eq/HCl) necesarios para producir un cambio de pH desde el inicial (pHi) hasta pH 4 o pH final (pHf). Al evaluar las muestras de SE, se observa que el grupo de mujeres con terapia hormonal AC posee una mayor capacidad amortiguadora que el grupo control.

En la Tabla 1b el patrón de comportamiento del flujo salival en mujeres en climaterio es similar, es decir, hay mayor capacidad amortiguadora en SE, no obstante, es menor si se compara con el grupo bajo terapia hormonal AC.

En las Tablas 2a y 2b se evaluó el pH y la capacidad amortiguadora, expresada como los microequivalentes de Hidróxido de Sodio ( eq/NaOH) necesarios para producir un cambio de pH desde el pHi hasta pH 10 o pHf. Al evaluar la SE se observa que el grupo de mujeres menopáusicas tuvo mayor capacidad amortiguadora que las del grupo control, pero en la saliva no estimulada la mayor capacidad amortiguadora se presenta en el grupo de mujeres con terapia hormonal AC en comparación al grupo control. En los dos tipos de saliva el comportamiento fue muy similar a excepción del grupo de mujeres con menopausia donde la cantidad de eq/NaOH necesarios para producir el cambio de pH fue mayor aunque no significativo en comparación al grupo con terapia hormonal AC y grupo control. No se observaron cambios en el pH tanto de la SE como la SNE en los grupos evaluados a excepción de grupo con terapia hormonal AC, donde el pH fue significativamente menor (p<0,05).

Tabla 1a pHi y Capacidad Amortiguadora de la saliva en Mujeres con Tratamiento Hormonal (Anticonceptivos). Prueba Piloto

Tabla 1b pHi y Capacidad Amortiguadora de la saliva en Mujeres Menopáusicas. Prueba Piloto

Tabla 2a pHi y Capacidad Amortiguadora de la saliva en Mujeres con Tratamiento Hormonal (Anticonceptivos). Prueba Piloto

Tabla 2b pHi y Capacidad Amortiguadora de la saliva en Mujeres Menopáusicas. Prueba Piloto.

DISCUSIÓN:

La saliva es esencial para el mantenimiento de la salud bucal; el número de mujeres que reciben algún tipo de hormonas, bien sea anticonceptivas o formando parte de Terapias de Reemplazo Hormonal, va en aumento, por lo que es importante analizar qué tanto afectan a la saliva las hormonas administradas a la mujer bajo algún tipo de tratamiento23. En el presente estudio, el pH y la capacidad amortiguadora fueron evaluadas en mujeres en etapa reproductiva sin terapia hormonal, con terapia hormonal anticonceptiva (AC) y mujeres menopáusicas. Se observó que mujeres con terapia hormonal AC poseen pH y capacidad amortiguadora mayor que el grupo control. Las diferencias no son estadísticamente significativas, pero dado que es una prueba piloto, las tendencias observadas no deben ser menospreciadas, se debe repetir el estudio con grupos más grandes de mujeres. Por otra parte, Maesh y col23. realizaron una investigación en la cual obtuvieron valores de pH salival en mujeres postmenopáusicas significativamente más bajos que en mujeres del grupo control. Sin embargo, el estudio hecho por Yalçin24 contrasta con los hallazgos de Maesh, los cuales fueron llevados a cabo usando saliva no estimulada. Observaciones de Laine y Leimola-Virtanen25, no mostraron cambios significativos en el pH pero no concuerdan con Sewón26 quien mostró aumento de los valores del pH durante terapia hormonal en mujeres menopáusicas.


CONCLUSIÓN

Los resultados parecieran indicar que el uso de terapia hormonal con anticonceptivos tipo estrógenos, produce una modificación tanto en el pH como en la capacidad amortiguadora de la saliva. Una evaluación más detallada y con muestras representativas de mujeres deberá ser ejecutada, siendo muy cuidadosos en las modificaciones del fluido salival debido a la edad y las terapias anticonceptivas y/o de reemplazo hormonal.